1. 毕业设计（论文）的内容和要求
琥珀酸是一种重要的四碳平台化合物，具有广阔的发展前景。而传统的化学生产方法污染大，成本高，抑制了琥珀酸的发展潜力。微生物发酵法制备琥珀酸以可再生生物质资源为原料，可实现对温室气体CO2的固定。但是，现有生物法制备琥珀酸的研究主要使用粮食作为原料，造成与人争粮，与粮争地等问题，而原料成本的逐年上升也部分制约了生物基琥珀酸的推广。相对而言利用木质纤维素类（占生物质资源总量的80%以上）降解组分生物转化产琥珀酸具有原料来源广泛、价格低廉、供应充足、可持续发展性强等优点，发展非粮原料通过生物转化生产生物质能源和化工产品已成为当前生物技术的研究热点。
木质纤维素主要由纤维素、半纤维素和木质素组成，利用酸解或酶解的方法可将其转化为还原性糖，产生大量的五碳糖（D-木糖和L-阿拉伯糖）和六碳糖（葡萄糖、半乳糖和甘露糖），其中葡萄糖约占65%，D-木糖约占25%。然而，具有良好的工业生产应用前景的产琥珀酸的野生型谷氨酸棒杆菌不能有效地利用木糖为碳源，本实验室已通过克隆E. coli K-12木糖异构酶基因xylA，将其连接于诱导型表达载体pXMJ19上，电转化C. glutamicum ATCC13032 Δldh,实现了木糖的利用，但是重组菌株在发酵过程中依然存在碳代谢阻遏效应，即重组菌株优先利用葡萄糖，在葡萄糖消耗完后开始有效利用木糖进行发酵。因此，本文拟通过构建重组质粒pK18mobsacB-ΔptsG，电转化谷氨酸棒杆菌C. glutamicum NC-2，敲除重组菌中ptsG基因，为解决碳代谢阻遏效应奠定了基础。
2. 参考文献
[1] 魏文德.有机化工原料大全[M].北京:化学工业出版社,1989.
[2] 司杭.化工产品手册[M].北京:化学工业出版社,1985.
[3] Zeikus J G , Jaim M K , Elankovan P. Biotechnology of Succinic Acid Production and Market for Derived Industrial Products [J]. Appl Microbiol. Biotechnol, 1999,51:525～545.
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