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1. 毕业设计（论文）主要内容：
近三十年来金属螯合层析发展迅速，因其拥有亲和力强，条件温和，成本低，分离方法迅速简便等优点而逐渐成为最受关注的分离纯化蛋白质的技术方法之一。修饰有多种配体的磁性微粒可螯合过渡金属离子并与组氨酸标签蛋白的组氨酸基团通过配位作用选择性结合，外加磁场分离后再用高浓度咪唑洗脱蛋白质从而达到分离纯化标签蛋白的目的。本课题拟通过先在液相中连接配体与硅烷偶联剂，再通过硅烷偶联剂与修饰有二氧化硅层的磁性微珠连接的方法分别制备两种带天冬氨酸配基的磁珠：一种是天冬氨酸磁珠，另一种为含有羧甲基的天冬氨酸磁珠，并用这两种磁珠分别对含有组氨酸标签的分散蛋白B和绿色荧光蛋白进行分离纯化。以往研究的做法是：逐步在磁性核上修饰各个修饰层，即先包裹二氧化硅层，再连接硅烷偶联剂，再连接配体。我们所提出的新方法的优势是：硅烷偶联剂先与配基连接后再与二氧化硅包被磁珠连接，硅烷偶联剂与二氧化硅层的连接是最后一步反应，避免了以往方法中先连接硅烷偶联剂再连接配基时硅烷偶联剂的脱落，而这种脱落是必然的，因为反应条件易导致脱落，而反应条件无法改变。我们的方法改变了反应顺序，因而避免了脱落反应，从而提高反应得率，提高磁珠表面配基量，同时即使是同样的反应，液液反应效率也高于固液反应效率。总之，我们的方案通过提高反应效率，可以得到更利分离应用的磁珠，使分离提取有更高的效率和选择性。
在分离纯化的过程中，分别通过蛋白质电泳和考马斯亮蓝测量蛋白质含量验证磁珠的选择性和计算吸附量以及洗脱量来考察上述磁珠在不同pH值和离子强度的缓冲溶液中对目标蛋白的分离纯化能力。最终可以找到新型磁珠分离纯化标签蛋白的最适pH以及离子强度，为制备的新型磁珠的金属螯合层析提供理论支持。
2. 毕业设计（论文）主要任务及要求
1.查阅不少于15篇的相关资料，其中英文文献不少于3篇，完成开题报告。
2.合成带天冬氨酸配基的磁珠并进行表征。
3.合成带羧甲基天冬氨酸配基的磁珠并进行表征。
3. 毕业设计（论文）完成任务的计划与安排
第1-2周：调研阅读资料，准备开题
第3周：开题，准备实验用品。
第4-14周：实验，中间穿插资料重新检索、撰写论文等。
4. 主要参考文献
[1] 杨柳. 钴螯合亲和介质的制备及其在六聚组氨酸融合蛋白纯化中的应用[D]. 西北大学, 2008.
[2] 王晓军, 范代娣. 金属螯合亲和层析在纯化重组类人胶原蛋白中的应用[J]. 高校化学工程学报, 2005(3):410-413.
[3] Hu X , Wang Y , Zhang L , et al. Design of a pH-sensitive magnetic composite hydrogel based on salecan graft copolymer and Fe 3 O 4 @SiO 2 nanoparticles as drug carrier[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2017, 107(Pt B).
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