环糊精糖基转移酶在毕赤酵母中的高效表达任务书

 2022-01-27 16:01:26

全文总字数:3606字

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

1.查阅资料,整理环糊精糖基转移酶性质、催化机理和应用。

2.了解和学习毕赤酵母表达系统。

3.熟悉毕赤酵母分泌表达异源蛋白系统的分类。

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2. 实验内容和要求

1.重组菌培养与重组酶的表达:携带环糊精糖基转移酶基因表达质粒的重组甘油菌活化,提质粒,核酸胶验证;重组质粒转化进毕赤酵母GS115并进行遗传霉素抗性筛选,重组酵母菌甘油保藏;重组菌培养及表达重组酶,离心收集发酵上清液。

2.蛋白质浓度测定。

3.SDS-PAGE分析。

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3. 参考文献

[1]Hedges A R. Industrial applications of cyclodextrins[J]. Chemical reviews, 1998, 98(5): 2035-2044.

[2]Singh M, Sharma R, Banerjee U C. Biotechnological applications of cyclodextrins[J]. Biotechnology advances, 2002, 20(5-6): 341-359.

[3]Del Valle E M M. Cyclodextrins and their uses: a review[J]. Process biochemistry, 2004, 39(9): 1033-1046.

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4. 毕业设计(论文)计划

第1-2周:查阅文献,了解课题。

第3-4周:熟悉实验原理和相关操作。

第5-6周:携带环糊精糖基转移酶基因表达质粒的重组甘油菌活化,提质粒,核酸胶验证;重组质粒转化进毕赤酵母GS115并进行遗传霉素抗性筛选,重组菌甘油保藏;重组菌培养及表达重组酶。

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