1. 1. 毕业设计（论文）的内容、要求、设计方案、规划等
前言:
内切β-1,4-木聚糖酶(1,4-β-D-木聚糖水解酶，EC3.2.1.8 )是一种专一性水解两个D－木糖之间的β-1,4糖苷键的水解酶，它在不同位点上优先作用于木聚糖和长链木寡糖，从β-1,4-木聚糖主链的内部切割木糖主链，水解产物主要为木二糖与木二糖以上的寡聚木糖，因此它可以被用于半纤维素的降解，为进一步的利用提供帮助，此外，木聚糖酶能大幅度提高木质纤维素物质的利用效率，在饲料工业、食品工业和造纸工业中具有巨大的应用前景。但表达量低制约了其在各领域中的应用。
透明颤菌血红蛋白(Vitreoscilla hemoglobin,VHb)是一种类似于人血红蛋白的胞内可溶物质,它能够从分子水平上提高VHb工程菌对氧气的利用能力,从而提高生物量积累,提高重组蛋白产量并且提高氧气的利用率,基于此种特性,到目前为止,VHb已经在不同的宿舍菌内共表达实现了α-淀粉酶、青霉素酰化酶及PHB等多种生化产品发酵生产成功应用。其中,巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是目前最优秀、应用最广泛的外源基因表达系统之一。它不但克服了大肠杆菌表达系统不能表达结构复杂的蛋白质、表达的蛋白多形成不溶性包涵体、背景蛋白多、表达量一般不是很高等缺陷;弥补了哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统操作复杂,表达水平低,产业化生产造价昂贵的不足,还具有其他酵母表达系统无法比拟的优越之处,但是酵母为高耗氧微生物,在高密度发酵过程中常常会出现供氧不足而限制了细胞密度的情况。本实验拟通过在毕赤酵母中共表达VHb蛋白来改善基因工程菌对氧气的利用效率来提高酶蛋白的分泌量从而提高活力。
2. 参考文献（不低于12篇）
[1] Xiaofeng Wang, Yongchuan Sun, Yunjun Yan,et al. Intracellular expression of Vitreoscilla hemoglobin improves production of Yarrowia lipolytica lipase LIP2 in a recombinant Pichia pastoris. Enzyme and Microbial Technology, 2012;50:22-28.
[2] Jyh-Ming Wu, and Wei-Chang Fu.Intracellular co-expression of Vitreoscilla hemoglobin enhances cell performance and β-galactosidase production in Pichia pastoris. J. BIOSCI. BIOENG ,2011;6-10
[3]于慧敏, 史悦, 沈忠耀, 杨胜利CO差光谱法分析重组大肠杆菌中的透明颤菌血红蛋白.清华大学学报,2002;42 (5):615-618
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