1. 毕业设计（论文）的内容和要求
本课题主要是通过利用基因定点突变、PCR技术、化学转化、电击转化及乙醇沉淀DNA等分子生物学操作手段，去除N-糖基化位点I38T、A69T和N266T，来研究N-糖基化位点对弹性蛋白酶活性的影响，旨在得到酶活性较高的弹性蛋白酶，进一步为弹性蛋白酶的工业化应用奠定基础。
2. 实验内容和要求
任务内容主要有：通过PCR技术进行定点突变，转入大肠杆菌感受态中进行大量扩增，然后提取克隆质粒进行测序，成功后，提取高浓度的克隆质粒，用双酶切切下目的基因，转载表达载体，然后用电击转化法转入毕赤酵母中，筛选出成功的菌株，用甲醇诱导产酶，并将发酵液进行纯化，最后测酶活性，并分析结果。
要求主要是：在实验过程中，要规范操作，得到相应的突变类型的菌株，并记录实验数据，与野生型的菌株产的弹性蛋白酶活性进行对比，分析得出相应的结果。
3. 参考文献
[1]谷新晰, 许文涛, 黄昆仑, 罗云波, 林希谨, 陈卓君, 田洪涛. 弹性蛋白酶基因（PAE）的克隆及在毕赤酵母中的表达[J]. 农业生物技术学报, 2009, 17(6): 1114-1118.
[2] Han M, Ding H, Wang J, et al. Expression of the las B gene encoding an organic solvent-stable elastase in Pichia pastoris and potential applications of the recombinant enzymes in peptide synthesis[J]. Biochemical Engineering Journal, 2013, 77: 154-160.
[3]韩铭海. 弹性蛋白酶在毕赤酵母中表达及N-糖基化位点突变对重组酶的影响[D]. 江南大学, 2013.
4. 毕业设计（论文）计划
第一阶段：调研、查阅相关资料。
第二阶段：设计实验方案，和大体时间安排。
第三阶段：完成N-糖基化位点对毕赤酵母表达的重组弹性蛋白酶活性的影响的实验。
以上是毕业论文任务书，课题毕业论文、开题报告、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
