1. 毕业设计（论文）的内容和要求
为了提高里氏木霉纤维素酶中β-葡萄糖苷酶的活性，从而更好地降解纤维素，根据根癌农杆菌介导里氏木霉转化方法的突出优点，构建更好的农杆菌转化体系，获得活性更高、转化率更好的转化子，本实验通过观察在不同浓度梯度氯化钙溶液下根癌农杆菌EHA105的感受态细胞的制备情况，筛选出最合适的钙离子的浓度。
在转化过程中，观察不同热激温度下农杆菌的转化状态，以确定出最合适的转化温度以便后续完成对里氏木霉的转化。
通过最终对平板上的阳性转化子个数进行分析，得到外源质粒DNA转化进入农杆菌EHA105时的最佳转化条件。
2. 实验内容和要求
在转化过程中，CaCl的浓度、感受态细胞的质量、转化时的热激温度、农杆菌自身的生产状态等等都会在一定程度上影响农杆菌的转化效率。
本实验以农杆菌EHA105为受体细胞，通过设置不同钙离子的浓度、转化时的热激温度使农杆菌处于不同的感受态，然后通过实验室现存的pUC18质粒进行转化，分析不同条件下对农杆菌EHA105转化效率的影响，从而筛选出最适合转化的最优条件，在最佳条件下转化已构建的Pact-Cel3d-pCAMBIA1300的质粒，旨在为后期对通过农杆菌介导里氏木霉的转化提供最佳的实验依据。
3. 参考文献
[1] 计巧灵, 王卫国. 植物遗传转化技术的应用[J]. 生物学通报, 2001,36(2):6-8.
[2] Rhodes C A, Pierce D A, Mettler I J, et al. Genetically transformed maize plants from protoplasts[J]. Science, 1998,240(4849):204-207.
[3] Jyothishwaran G, Kotresha D, Selvaraj T, et al. A modified freeze-thaw method for efficient transformation of Agrobacterium tumefaciens
4. 毕业设计（论文）计划
3月5日-3月12日，主要确定实验操作步骤以及准备实验所需要的培养基等。
3月13日-3月20日，在锥形瓶中培养农杆菌，观察农杆菌的生长情况并绘制生长曲线。
3月21日-3月28日，利用不同的氯化钙浓度处理农杆菌，找到最合适的感受态制备条件，本实验准备设置8个不同浓度的氯化钙溶液处理感受态细胞。
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