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1. 毕业设计（论文）的内容和要求
一、论文内容：核苷酸在食品、农业和医学中有重要的应用。
5-尿苷酸(5-UMP)和5-胞苷酸(5-CMP)是制备几种核苷酸衍生物的关键中间体。
5-UMP是生产尿苷5-UTP的原料[1]和糖核苷酸[2-6]。
2. 实验内容和要求
1、主要研究内容及关键技术1.1主要研究内容：（1）完成关键酶uck质粒构建；（2）优化关键酶的表达；（3）敲除生成副产物尿苷酸相关基因；（4）最优条件下，利用酶法生产胞苷酸1.2关键技术：NCBI基因数据库的使用、基因工程重组大肠杆菌表达、Crispr-Cas9敲除技术、各种表征手段（HPLC、GC-MS等）。
2、拟采取的研究方法、技术路线、实施方案2.1主要研究方法及实施方案（1）本论文拟将在大肠杆菌BL21(DE3)中构建过表达胞苷激酶，构建重组大肠杆菌生产胞苷酸；（2）在此基础上，为了提高胞苷激酶的表达效果，对其培养条件进行优化；（3）为了减少其副产物尿苷酸的生成利用 Crispr-Cas9敲除技术对其生成基因进行敲除，并对其进行验证，最终生成胞苷酸。
3. 参考文献
[1] Jozef N, Liu Z, Gemeiner P, et al. Nucleoside triphosphates production using recombinant Escherichia coli entrapped in calcium pectate gel [J]. Biotechnology Letters, 2002, 24(11):925-930.
[2] Bulter T, Wandrey C, Elling L. Chemoenzymatic synthesis of UDP-N- acetyl-α- d- galactosamine [J]. Carbohydrate Research, 1997, 305(3):469-473.
[3] Ma X, Stoeckigt J. High yielding one-pot enzyme-catalyzed synthesis of UDP-glucose in gram scales [J]. Carbohydrate Research, 2010, 32(45):469-473.
4. 毕业设计（论文）计划
起讫日期 设计（论文）各阶段工作内容2020.12.11-2020.12.16 选题，与导师讨论题目2020.12.31 导师下达任务书2020.12.31-2021.1.14 根据任务书要求，查找相关文献资料，完成任务书2021.01.14-2021.2.21 撰写并提交开题报告2021.02.22-2021.05.23 完成实验并提交论文初稿2021.05.23-2021.06.03 根据导师意见修改论文初稿，完成并提交终稿2021.06.03-2021.06.12 完成论文的审阅，准备答辩
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