几丁质酶多酶复合体系的构建及其降解几丁质制备GlcNAc的研究任务书

 2022-01-30 19:28:02

全文总字数:4117字

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

虾蟹壳中含有诸多高附加值物质,如几丁质、蛋白质、脂质及虾青素等。

其中,几丁质是由N-乙酰氨基葡萄糖聚合而成的多糖,在自然界中以α、β、γ三种构型存在,α-几丁质为其最主要的构型[1]。

几丁质在许多领域发挥着重要作用。

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2. 实验内容和要求

1.几丁质酶基因的挖掘通过结合Chitinibacter sp. GC72全基因组测序及胞外酶蛋白质谱的分析,挖掘出几丁质降解过程中的关键基因,该部分委托苏州普泰生物公司及南京金斯瑞生物公司完成。

2.几丁质酶的异源表达以Chitinibacter sp. GC72基因序列为模板设计引物,通过PCR技术获得几丁质酶核酸序列,将其连接至线性化的pET28a( )空载上,并导入BL21(DE3)中进行表达。

3.几丁质酶的酶学性质探究(1)步骤2中发酵液离心收集菌体备用;(2)使用AKTA蛋白纯化仪纯化步骤(1)中蛋白;(3)探究几丁质酶的酶学性质,确定其最适温度及pH;(4)几丁质酶协同机制的探究在体系中复配不同类型、比例的几丁质酶,确定其最适添加比,最后将复配得到的最优比的酶系混合物,应用于几丁质的降解研究中。

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3. 参考文献

[1] Xia W S, Liu P, Zhang J L, et al. Biological activities of chitosan and chitin ligosaccharides. Food Hydrocolloid. 2011,53(25):170-179.

[2] 刘星. 几丁寡糖联合顺铂对肺癌A549细胞及其移植瘤的影响[D].辽宁中医药大学,2017.

[3] Ikeda I, Sugano M, Yoshida K, et al. Effects of chitosan hydrolysates on lipid absorption and on serum and liver lipid concentration in rats. J. Agri. Food Chem.1993,41(8): 431-435.

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4. 毕业设计(论文)计划

起讫日期 设计(论文)各阶段工作内容2020.12.12-12.20 选题,与导师讨论题目2020.12.31 导师下达任务书2020.12.31-2021.1.10 根据任务书要求,查找相关文献资料 2021.01.11-2021.01.23 提交开题报告和文献翻译2021.01.23-05.23 完成试验并提交论文第一稿2021.05.24-05.27 根据导师意见修改论文第一稿,完成并提交第二稿2021.05.28-06.1 根据导师意见修改论文第二稿,完成并提交第三稿2021.06.1-06.7 完成论文的审阅,准备答辩

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