全文总字数：6228字
1. 毕业设计（论文）的内容和要求
（1）掌握文献查阅的一般方法，学会在中国期刊网、Web of Science科学引文索引、Springer Link电子期刊、Elsevier SDOS电子期刊等检索资源上查阅关于枯草芽孢杆菌生物合成四甲基吡嗪和3-羟基丁酮等的相关文献，并对枯草芽孢杆菌基因操作和发酵培养条件优化有全面了解。
（2）文献阅读及综述：阅读与课题相关的中英文文献，了解国内外的研究动态，撰写文献综述。
（3）明确实验任务，拟定实验方案：根据所查阅文献的内容，确定研究内容及方案，拟定科学可行的研究计划。
2. 实验内容和要求
（1）实验内容本研究拟通过代谢工程手段改良具有四甲基吡嗪生产潜力的菌株，以遗传背景清晰的枯草芽孢杆菌为底盘微生物，通过代谢工程策略对四甲基吡嗪合成路径进行胞内表达，探索提高菌株四甲基吡嗪的耐受性和产量，为工业化生产四甲基吡嗪奠定基础。
（2）实验要求本课题要求学生在查阅相关文献的基础上，以实验室保藏的枯草芽孢杆菌为出发菌株，通过基因工程手段和代谢工程策略对枯草芽孢杆菌进行改造，提高该菌株利用葡萄糖代谢积累四甲基吡嗪及其前体乙偶姻的生产性能，并对菌株在摇瓶发酵培养中的生长状况和四甲基吡嗪合成情况进行分析，进而以四甲基吡嗪的产量和耐受性为指标，优化菌株摇瓶发酵培养基成分和发酵条件，确定最适合菌株生产四甲基吡嗪的发酵过程控制参数。
3. 参考文献
[1] Zhu B F, Xu Y, Fan W L. High-yield fermentative preparation of tetramethylpyrazine by Bacillus sp. using an endogenous precursor approach[J]. Journal of industrial microbiology biotechnology, 2010, 37(2): 179-186.
[2] Zhu B F, Xu Y. A feeding strategy for tetramethylpyrazine production by Bacillus subtilis based on the stimulating effect of ammonium phosphate[J]. Bioprocess and biosystems engineering, 2010, 33(8): 953-959.
[3] Zhu B F, Xu Y. Production of tetramethylpyrazine by batch culture of Bacillus subtilis with optimal pH control strategy[J]. Journal of industrial microbiology biotechnology, 2010, 37(8): 815-821.
4. 毕业设计（论文）计划
第1-2周：熟悉实验原理和实验操作，查阅文献，对课题进行初步探索。
第3-8周：以实验室保藏的枯草芽孢杆菌为出发菌株，通过基因工程手段和代谢工程策略对枯草芽孢杆菌进行改造，提高该菌株利用葡萄糖代谢积累四甲基吡嗪及其前体乙偶姻的生产性能。
第9-14周：对菌株在摇瓶发酵培养中的生长状况和四甲基吡嗪合成情况进行分析，进而以四甲基吡嗪的产量和耐受性为指标，优化菌株摇瓶发酵培养基成分和发酵条件，确定最适合菌株生产四甲基吡嗪的发酵过程控制参数。
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