pelB引导的内切菊粉酶基因在大肠杆菌中的表达及其产物分析任务书

 2022-06-04 22:40:49

1. 1. 毕业设计(论文)的内容、要求、设计方案、规划等

前言应包括研究背景意义、国内外研究现状、趋势、存在的问题和课题的立体依据。需要广泛查阅与课题有关的文献,充分掌握一手、二手资料,运用恰当充分。确定该论文研究的理论基础或依据。实验数据采集与处理要求养成及时记录实验报告的良好习惯,以真实实验为基础,将实验数据采集之后交由计算机分析处理,做到实验数据不仅真实可靠,而且清晰、明确。培养严肃的科研态度和严密的逻辑思维能力;掌握发酵操作的基本流程。结果分析要求论证逻辑紧密,概念准确。结论要求正确、凝炼课题研究的成果。附表和附图及书写要求规范,文字要求语言通顺,文字流畅、简练,书写整洁。

菊粉是由β-呋喃果糖以β-2,1-糖苷键相连,并在其还原端接一个α-吡喃葡萄糖基的果聚糖。菊粉呈直链结构,聚合度(DP)为2~60,相对分子质量在3500~5500之间。它主要存在于菊芋、菊苣、蒲公英、牛蒡和朝鲜蓟等植物体的根部或茎部,是一种来源丰富的可再生资源。菊粉酶是一类能水解菊粉生产果糖和果聚糖的酶。前期实验中,将一个来源于黑曲霉的内切菊粉酶基因在大肠杆菌(Escherichia coli BL21(DE3))中成功表达。为了进一步提高重组菊粉酶在大肠杆菌中的高效表达,本研究将PelB信号肽融合到内切菊粉酶成熟蛋白的N端。PelB可将目的蛋白引导质周质空间。本研究实现重组内切菊粉酶基因在大肠杆菌中的表达,并考察信号肽对重组内切菊粉酶表达的影响。在此基础上,以菊粉为原料,考察了该内切菊粉酶水解菊粉所得低聚糖的特征。

2. 参考文献(不低于12篇)

[1] Hyun-Ju Kwon,Sung-Jong Jeon,Dong-Ju You,et al. Cloning and characterization of an exoinulinase from Bacillus polymyxa[J]. Biotechnology Letters, 2003, 25, 155-159.

[2] Tong Zhang,Zhe Chi, Zhenming Chi, Jean-Luc Parrou and Fang Gong. Expression of the inulinase gene from the marine-derived Pichia guilliermondii in Saccharomyces sp. W0 and ethanol production from inulin[J]. Microbial Biotechnology.2010, 3(5), 576582.

[3] 李秋杰,高健,等. 1株多粘类芽孢杆菌产菊粉酶粗酶学性质的研究[J]. 安徽农业科学, 2010, 38, 3877-3879.

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