1. 毕业设计（论文）的内容和要求
本课题主要是通过利用基因定点突变、质粒提取、化学转化、电击转化及目的基因的亚克隆等分子生物学操作手段，引入糖基化位点I38T、A69T和N266T，来研究糖基化位点对重组弹性蛋白酶稳定性的影响，进一步为弹性蛋白酶的工业化应用奠定基础。
2. 实验内容和要求
任务内容主要有：通过定点突变技术，将获得的目的基因转入大肠杆菌中进行大量扩增，然后提取克隆质粒进行测序，成功后，提取高浓度的克隆质粒，构建表达载体，然后用电击转化法转入毕赤酵母中，筛选出转化成功的菌株，再利用甲醇诱导，并将得到的发酵液进行纯化，最后测酶对热和在有机溶剂内的活性，并分析结果。
要求：在实验过程中，要规范操作，得到相应的突变类型的菌株，并记录实验数据，与野生型的菌株产的弹性蛋白酶对热和有机溶剂内稳定性进行对比，分析得出相应的结果。
3. 参考文献
[1]刘小杰, 陈启和. 弹性蛋白酶的研究进展[J]. 中国食品添加剂, 2004, 4:29-32.
[2]杨梅. 毕赤酵母蛋白表达系统研究进展[J]. 生物技术通报, 2011(4): 46-51.
[3]韩铭海. 弹性蛋白酶在毕赤酵母中表达及N_糖基化位点突变对重组酶的影响[D]. 江南大学，2013.
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4. 毕业设计（论文）计划
第一阶段：调研、查阅相关资料。
第二阶段：设计实验方案，和大体时间安排。
第三阶段：完成糖基化对毕赤酵母表达的重组弹性蛋白酶稳定性的影响实验。
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