农杆菌介导转化cel3d到里氏木霉RutC-30中及其鉴定任务书

 2023-10-23 09:16:27

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

本实验通过研究农杆菌介导转化cel3d到里氏木霉RutC-30中对纤维素酶诱导表达过程中的作用机制,进而建立更完善的里氏木霉产纤维素酶的产酶机制,为工业生产选用低廉高效的纤维素酶的诱导分子和今后从分子水平改造里氏木霉成为廉价、高效、高产的纤维素酶的合成机器奠定理论基础。

2. 实验内容和要求

本实验将采用根癌农杆菌介导转化方法转化cel3d到里氏木霉RutC-30中及其鉴定各类纤维素酶酶活的测定(1)滤纸酶活,以滤纸为底物,在一定反应条件(pH4.8,50℃,恒温lh)下,以水解反应中,1ml纤维素酶液1min催化纤维素生成lμg葡萄糖为1个滤纸酶活单位,以U表示。

(2)内切葡萄糖苷酶,以羧甲基纤维素钠(CMC)为底物,测定反应产生的还原糖含量的增加。

(3)外切葡萄糖苷酶以对硝基苯纤维二糖苷为底物,测定反应生成的对硝基苯的含量的增加。

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3. 参考文献

1.潘宝海,李德发,陆文清,代建国,对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖法测定饲用α-半乳糖苷酶(黑曲霉)活力的方法,《中国农业大学报》,2002,7(5):107-111 2.钟开新,陈丽芝,李阳源,里氏木霉α-半乳糖苷酶基因agl2在毕氏酵母中高效表达《微生物学杂志》2015 3.安莉颖,易欣欣,秦丽娜,里氏木霉RutC30常温常压等离子体(ARTP)诱变筛选pyr4基因缺陷型菌株及转化系统的建立《菌物学报》-2014 4.文静里氏木霉RutC-30β-甘露聚糖酶基因在大肠杆菌中的外分泌型表达,内蒙古农业大学-2004 5.张倩,李志敏,叶勤根癌农杆菌介导的VHb异源表达及其对里氏木霉的影响,《工业微生物》-2014 6.安莉颖,施思,谭德勇里氏木霉RutC-30产纤维素酶条件优化研究,《安徽农业科学》-2012 7.刘刚,杨长得,康康根癌农杆菌介导里氏木霉转化体系的建立和条件优化,《生物技术》-2011 8.闫作梅,张旭,李杰农杆菌介导法构建里氏木霉ura3基因突变体的研究,《东北农业大学学报》-2011

4. 毕业设计(论文)计划

一、T.reesei转化受体的制备

二、农杆菌的制备

三、里氏木霉和农杆菌的共培养

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