果蝇细胞凋亡调控蛋白dIAP作用于toll途径任务书

 2021-08-20 22:10:49

1. 毕业设计(论文)主要内容:

细胞凋亡途径和toll途径都是决定细胞生存的关键途径,这些途径包括大量的酶及调控因子。如果能够探究出这两者之间的关系,对于天然免疫和细胞凋亡的研究都具有极其重要的影响。至今尚未有两者之间存在关系的文献报道。其中,果蝇中细胞凋亡途径中的dIAP通过抑制dronc和drice从而抑制凋亡,而有研究表明dIAP具有泛素化酶活性,toll途径下游的NF-KB(包括DIF,drosal等)受泛素化调节,猜测dIAP可以作用于NF-KB。

2. 毕业设计(论文)主要任务及要求

1、从基因文库调取DIAP1基因, cact基因,DIF基因,drosal基因,并制备大肠杆菌克隆

设计相应引物,由公司合成,通过pcr从果蝇基因文库中调取DIAP1基因, cact基因,DIF基因,drosal基因;在并37摄氏度PEG存在利用T4连接酶与T载体,pac载体连接;利用氯化钙制备感受态细胞,将上诉外源基因用热激法转化到大肠杆菌中,涂布平板,制备克隆。

2、克隆筛选

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3. 毕业设计(论文)完成任务的计划与安排

第1-2周:查阅相关文献资料,明确研究内容,了解毕业课题的意义以及论文所涉及到的实验方法和技术方案,为课题顺利进行做前期大量的文献调研工作,确定方案,完成开题报告。

第3-9周:从基因文库调取DIAP1基因, cact基因,DIF基因,drosal基因,并制备大肠杆菌克隆;克隆筛选测序并保种。

第10-13周:将DIAP1基因, cact基因,DIF基因,drosal基因转化到果蝇S2细胞系中 ;蛋白提取及蛋白间相互作用的鉴定

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4. 主要参考文献

1、Leah R Sabin ,Sheri L Hanna and Sara Cherry:Antiviralimmunity in drosophila.ScienceDirect 2010.22:4-9.

2、BruceA.Hay and MingGuo:Caspase-Dependent CellDeath in Drosophila. Annu.Rev.Cell Dev.Biol.2006.22:623C5

3、Maximiliano Javier Jimenez-Dalmaroni,M.EricGerswhin ,IannisE.Adamopoulos: The critical role of toll-like receptorsFrom microbial recognition to autoimmunity:Acomprehensive review. AUTREV-01762;Noof Pages8,2015.8

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