大西洋三文鱼LAMP引物设计与优化任务书

 2022-01-16 17:40:39

全文总字数:1834字

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

环介导等温扩增(LAMP)是2000年日本学者等建立的核酸等温扩增技术,是针对基因的6个区域设计种特异引物,使反应具有极高的扩增特异性,利用一种链置换聚合酶(在等温条件(约65C保温约,即可完成目的基因扩增反应,从而克服了反应需要反复的热变性获得单链模板的缺点,避免反复升降温的耗时过程,具有简单、快速、特异性强、敏感性高的特点,而且反应不需要仪和昂贵的试剂,有利于在一些基层机构和现场检测的应用。

目前,检测已广泛用于疾病诊断、病原微生物检测、转基因食品鉴定以及动物胚胎的性别鉴定等领域。

LAMP的高特异性和灵敏度等特点高度依赖于4条引物的性质。

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2. 实验内容和要求

1)设计大西洋三文鱼特异性LAMP引物;2)LAMP扩增过程优化; 3)LAMP扩增结果的荧光检测和可视化检测

3. 参考文献

[1] Rolando, J.C., et al., Real-time kinetics and high-resolution melt curves in single-molecule digital LAMP to differentiate and study specific and non-specific amplification. Nucleic Acids Research, 2020. 48(7): p. e42-e42.

[2]. Duan, Y., et al., Development and application of loop-mediated isothermal amplification for detection of the F167Y mutation of carbendazim-resistant isolates in Fusarium graminearum. Scientific Reports, 2015. 4(1).

[3]. Wang, D., et al., Two Methods for Increased Specificity and Sensitivity inLoop-Mediated Isothermal Amplification. Molecules, 2015. 20(4): p. 6048-6059.

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4. 毕业设计(论文)计划

1)2020年09月-2020年11月查阅文献,完成外文翻译、文献综述和开题报告等工作;2)2020年12月-2021年05月完成课题的实验部分;3)2021年05月-2021年05月完成毕业论文写作,进行毕业设计的审阅和修改完善;4)2021年06月完成毕业论文的答辩资格审查、答辩;

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