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1. 毕业设计(论文)的内容和要求
一、论文内容: 烟酰胺单核苷酸是烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nicotinamide phosphate ribose transferase,Nampt)反应的产物,是NAD 的关键前体之一。
在哺乳动物体内,烟酰胺单核苷酸由烟酰胺(Nicotinamide,Nam)在Nampt的催化下生成,随后烟酰胺单核苷酸在烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶(Nicotinamide mononucleotide adenosine transferase)的催化下生成NAD 。
细胞外烟酰胺单核苷酸需要去磷酸转化为烟酰胺核苷(Nicotinamide riboside,NR)才能进入肝细胞内部,进入胞内后,NR在烟酰胺核苷激酶1(Nicotinamide riboside kinase,NRK1)的作用下磷酸化生成烟酰胺单核苷酸,随后烟酰胺单核苷酸和ATP结合生成NAD 。
2. 实验内容和要求
1.设计合成烟酰胺单核苷酸的路径:查阅相关文献并借助数据库,设计合成烟酰胺单核苷酸的路径。
2.关键酶的筛选、表达及优化:所需用的关键酶从数据库中找出,并将其构建至pET28a质粒上, LB培养基加相应的抗性,IPTG诱导20℃过夜培养,收集菌体将其破碎、跑胶,如果有不可溶性蛋白需对其进行优化。
3.酶活性质研究:查阅关键酶的相关文献,建立检测酶活表征的方法,进而研究酶活性质。
3. 参考文献
[1] Putt K S , Hergenrother P J . An enzymatic assay for poly(ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) via the chemical quantitation of NAD( ): application to the high-throughput screening of small molecules as potential inhibitors.[J]. Analytical Biochemistry, 2004, 326(1):78-86.
[2] Formentini L , Moroni F , Chiarugi A . Detection and pharmacological modulation of nicotinamide mononucleotide (NMN) in vitro and in vivo[J]. Biochemical Pharmacology, 2009, 77(10):1612-1620.
[3] Mills K , Yoshida S , Stein L , et al. Long-Term Administration of Nicotinamide Mononucleotide Mitigates Age-Associated Physiological Decline in Mice[J]. Cell Metabolism, 2016, 24(6):795-806.
4. 毕业设计(论文)计划
起讫日期 设计(论文)各阶段工作内容2020.12.18-12.20 选题,与导师讨论题目2020.12.31 导师下达任务书2020.12.31-2021.1.10 根据任务书要求,查找相关文献资料 2021.01.11-2021.02.21 提交开题报告2021.02.21-05.23 完成试验并提交论文第一稿2021.05.24-05.27 根据导师意见修改论文第一稿,完成并提交第二稿2021.05.28-06.1 根据导师意见修改论文第二稿,完成并提交第三稿2021.06.1-06.7 完成论文的审阅,准备答辩
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