1. 1. 毕业设计(论文)的内容、要求、设计方案、规划等
传统抗生素能显著提高畜禽的生产性能,但这些抗生素在畜禽体内的残留容易造成食品安全性问题,而天然植物饲料添加剂具有绿色、安全、无毒副作用或毒副作用低等特点,因此开发天然植物资源作为抗菌药物的替代物已成为饲料领域的研究热点之一。
银杏又称白果,属裸子植物银杏科的单型种,银杏叶中含有黄酮类、萜类、酚类等多种活性成分,具有抗菌消炎、抗病毒、抗氧化能力等作用。银杏叶及银杏叶的提取物,已经被广泛应用于医疗、食品防腐剂、植物保护和化妆品等领域,但国内对银杏叶作为饲料添加剂的研究较少。本研究旨在利用银杏叶中活性物质的药用价值,用以替代抗生素,探求银杏叶在畜禽生产中的推广应用前景。
近年来,益生菌以其独特的作用方式和生态效应,已被广泛应用于食品、医疗、畜禽和水产养殖等领域。在养殖业中相对使用抗生素而言,作为新型绿色添加剂的益生菌,由于其无残留、无污染以及不产生耐药性等特点,有其独特的优越之处,已逐步应用于畜禽业生产。
芽孢杆菌类微生物是一类好氧、可形成芽孢的革兰阳性菌,是国际公认的可在饲料制剂中食用的微生物菌种。
已有研究表明,芽孢杆菌在不利环境条件下能以孢子形式存在,在饲料制粒、贮存及胃酸环境中仍能保持较高的活性,在改善畜禽生产性能、维持肠道菌群平衡、提高消化率等方面均有较好的效果。芽孢杆菌为需氧菌,在生长过程中消耗大量的氧气,使肠道内氧气浓度降低,为肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌等生理性厌氧菌的生长繁殖提供有利环境;同时,使得需氧的有害病原菌的生长由于缺氧而受到抑制,从而使菌群失调得以调整、肠道功能得以恢复,最终使胃肠道的微生态体系处在健康平衡的状态,动物的免疫力得到提高。芽孢杆菌在生长代谢过程中能产生多种抗菌物质,如短杆菌肽、枯草菌素和多粘菌素等,对常见的致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有较强的抑制作用。芽孢杆菌在生长的过程中,可产生蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶等多种助消化酶,同时在消除抗营养因子上也发挥了重要作用。
目前国内关于芽孢杆菌在饲料中的应用研究也比较多,而且取得了一定的应用效果。陈家祥等(2010)研究发现,日粮中添加地衣芽孢杆菌有益于肉鸡的肠道发育和盲肠微生物区系平衡,饲养前期50mg/kg添加水平,饲养后期200mg/kg添加水平显著优化了肉鸡的肠道组织结构,抑制了盲肠中有害菌的生长。周振峰(2006)研究发现,每千克精饲料中20亿单位的地衣芽孢杆菌可显著提高泌乳奶牛产奶性能,同时奶品质有所改善,并且奶牛抵抗热应激的能力增强。但目前尚无以银杏叶为主要原料,以益生菌芽孢杆菌为菌株,进行固态发酵制备的产品的研究报道,本研究将制备的产品应用于饲料添加剂中,本试验研究在蛋鸡日粮中加入不同水平银杏叶发酵物对蛋鸡血清脂类代谢及鸡蛋脂肪酸含量的影响。选用2016只49周龄的蛋鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复84只,分别饲喂4种日粮,其中对照组饲喂基础日粮,CF组、AF组和CAF组分别在基础日粮中添加0.5%的产朊假丝酵母(Candida utilis)、黑曲霉(Aspergillus niger NL-1)及产朊假丝酵母和黑曲霉双菌发酵后的银杏叶。试验期八周。以期获得更为有效的饲喂效果。
方案拟定:实验的设计根据本课题组的方案统一进行。试验设计、材料与方法的描述要合理。
1 试验目的
银杏叶生物饲料添加剂中的主要功能性成分有黄酮类化合物、活性多糖、氨基酸、多种酶等,具有促生长、抗氧化、提高免疫力等生物学功效。本试验验证银杏叶生物饲料作为饲料添加剂在蛋鸡生产中的应用效果。
2. 黑曲霉银杏叶固态发酵物的制备
1.1 营养盐溶液的配制:按葡萄糖1.5%(即每100mL营养盐溶液中含葡萄糖1.5g,下同),K2HPO4 0.3%,MnSO4 0.02%,MgSO47H2O 0.05%,FeCl3 0.01%的量依次称取并溶解于水中,配成营养盐溶液;
1.2 固体培养基的制备:按银杏叶粉末:豆粕:麸皮=7:2:1的比例称取三者,混匀;
1.3 按每10g固体培养基加12mL营养盐溶液的比例将上述两者混合,搅拌均匀,配制成发酵培养基;将配制好的发酵培养基在121℃温度下灭菌1h,取出,冷却;
1.4 在接种室进行常规的无菌操作,每10g发酵培养基接种地衣芽孢杆菌2mL(地衣芽孢杆菌的培养采用液体法,常规的种子液体培养法,37℃、180r/min下摇瓶培养),37℃下培养48h,发酵结束;
1.5 在低于80℃的条件下干燥,粉碎,即得。
3 试验动物及处理
选用2016只49周龄的蛋鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复84只,分别饲喂4种日粮,其中对照组饲喂基础日粮,CF组、AF组和CAF组分别在基础日粮中添加0.5%的产朊假丝酵母(Candida utilis)、黑曲霉(Aspergillus niger NL-1)及产朊假丝酵母和黑曲霉双菌发酵后的银杏叶。饲料为粉状料。试验期八周。试验基础日粮配方及营养成分见表1。
蛋鸡饲养于三层阶梯笼内,在开放式鸡舍内饲养。为最大程度减少温度、光线及其它非人为因素对结果的影响,各组鸡在南北两列鸡笼均有分布。乳头式饮水器自由饮水,每天16小时光照。每天喂料两次(上午6:00,下午3:00),定时拨匀料槽中的饲料,使蛋鸡充分采食。根据上一天采食情况适当调整当天喂料量,保证当天晚上料槽中基本无剩料。下午4:00开始集蛋、称蛋重。预试两周后,进行正式试验。
表1 基础日粮组成及营养水平
Tabel 1 Feed composition and nutrition content
原料组成 | 营养价值 | ||
玉米 | 615 | 表观代谢能 (MJ/kg) | 11.1 |
豆粕, 470 g CPa/kg | 230 | 粗蛋白 | 161 |
麸皮 | 20 | 赖氨酸 | 7.6 |
玉米油 | 10 | 蛋氨酸 | 3.5 |
石粉 | 95 | 总含硫氨基酸 | 6.1 |
磷酸氢钙 | 17 | 苏氨酸 | 6.3 |
食盐 | 3 | 色氨酸 | 2.0 |
1%预混料1 | 10 | 钙 | 39 |
总磷 | 6.4 | ||
有效磷 | 4.3 |
注:1每千克全价饲粮中添加:维生素A 10000 IU,维生素D3 2500 IU,维生素E 18 IU,维生素K3 1mg,维生素B1 2mg,维生素B2 6mg,维生素B6 3.5mg,维生素B12 15ug,烟酸63mg,泛酸18mg,叶酸0.4mg,生物素0.15 mg,铁80mg,铜9mg,锌70mg,锰80mg,碘0.6mg,硒0.3mg。
2计算值。
4 测定指标及方法
4.1 血清生化指标的测定 试验结束当日从每个重复组分别随机抽取5只鸡,空腹,用真空采血管翅静脉采血2 mL,分离血清于-4℃保存待测。血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素氮(BU)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血钙、血磷用全自动生化分析仪(型号为GLAMOUR 2000)测得,试剂盒购自北京中生北控生物科技有限公司。
实验数据采集与处理:详细做好实验记录,数据分析用SPSS或SAS数据分析软件。要求会用Excle进行常规作图。
结果分析:对结果与分析的描述要求准确到位。
讨论和结论:应论点明确,重点突出,不能与结果重复、离题。
2. 参考文献(不低于12篇)
指定阅读的中文参考文献如下:
[1] 张旭晖, 都海明, 朱秋凤, 等. α-生育酚琥珀酸酯对肉鸡抗氧化功能与肌肉品质的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2010, 41(3):286294.
[2] 倪迎冬, 洪文杰, 任灵芝, 等. 大豆黄酮对母鸡蛋品质及后代仔鸡肉品质的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2007, 38(11):11881194.
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